Scoperta di nuovi prodotti naturali per il controllo delle zanzare
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Scoperta di nuovi prodotti naturali per il controllo delle zanzare

Jul 05, 2023

Parassiti e vettori volume 15, numero articolo: 481 (2022) Citare questo articolo

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Il controllo dei vettori svolge un ruolo chiave nel ridurre il peso sanitario pubblico delle malattie trasmesse dalle zanzare. Le odierne strategie di controllo dei vettori si basano in gran parte su insetticidi sintetici che possono avere un impatto ambientale negativo se applicati all’aperto e spesso diventano inefficaci a causa della capacità delle zanzare di sviluppare resistenza. Un approccio alternativo e promettente per aggirare queste sfide prevede l’implementazione di insetticidi derivati ​​dalla natura (biopesticidi) per il controllo dei vettori. I biopesticidi possono costituire organismi presenti in natura o sostanze da essi derivate che hanno effetti di riduzione della durata della vita sui vettori di malattie come le zanzare. Qui presentiamo la scoperta e la valutazione di agenti di controllo biologico basati su prodotti naturali che possono potenzialmente essere sviluppati in biopesticidi per il controllo delle zanzare. Abbiamo analizzato una raccolta di prodotti naturali comprendente 390 composti e inizialmente identificato 26 molecole con potenziale capacità di uccidere gli stadi larvali della zanzara della febbre gialla Aedes a Egypti, responsabile della trasmissione di virus come dengue, Zika, chikungunya e febbre gialla. I prodotti naturali identificati come risultati positivi sullo schermo sono stati ulteriormente valutati per verificarne l'idoneità allo sviluppo di biopesticidi. Abbiamo dimostrato che una selezione dei prodotti naturali più efficaci, bactobolin, maitansina e ossamicina, hanno ucciso anche gli stadi larvali della zanzara Anopheles gambiae che trasmette la malaria, nonché la forma adulta di entrambe le specie. Abbiamo esplorato ulteriormente l'utilità di estratti grezzi e preparati provenienti da due delle migliori fonti di candidati (organismi di origine) per l'attività zanzaricida, ovvero estratti dai due batteri Burkholderia thailandensis e Streptomyces hygroscopicus var. ossamiceticus.

Le infezioni trasmesse da vettori continuano a rappresentare un grave problema di salute pubblica; circa l’80% della popolazione mondiale è a rischio di contrarre una malattia trasmessa da vettori [1]. Malaria, dengue, Zika, chikungunya, febbre gialla e altre malattie trasmesse dalle zanzare causano più di 1 milione di morti ogni anno in tutto il mondo e sono responsabili di un enorme carico socioeconomico, soprattutto nelle regioni sottosviluppate [2,3,4,5,6 ].

Un controllo efficiente dei vettori è la strategia preventiva più efficace e le notizie incoraggianti di un calo del numero di casi di malaria all’inizio del ventunesimo secolo sono state attribuite principalmente all’uso del controllo dei vettori basato su insetticidi [7]. Le stime dell’ultimo rapporto World Malaria (2021) indicano che tra il 2000 e il 2020 sono stati evitati 1,7 miliardi di casi e 10,6 milioni di decessi [2].

Tuttavia, il controllo dei vettori si basa principalmente su insetticidi chimici con pochissimi bersagli e questi insetticidi sono stati recentemente sempre più associati a maggiore resistenza, tossicità fuori bersaglio e persistenza di lunga durata in natura [8]. I prodotti naturali (NP), comunemente metaboliti secondari prodotti da batteri, piante o funghi, sono considerati un'alternativa promettente ai composti insetticidi sintetici rispetto a questi problemi [8, 9]. La tossicità e gli effetti ambientali generalmente minori dei biopesticidi sono stati affrontati nel settore agricolo dove la necessità di metodi alternativi, e quindi l’interesse per i biopesticidi, è notevolmente aumentata [10, 11]. Storicamente, gli estratti e i composti isolati dalle risorse naturali hanno contribuito a molti aspetti della salute medicinale attraverso la loro attività antibiotica, antitumorale, antifungina, antibatterica o antiparassitaria [12, 13].

Il biopesticida a base di NP più consolidato utilizzato oggi per il controllo delle zanzare è costituito da cristalli di Bacillus thuringiensis var. israelensis (Bti) [14]. I suoi benefici sono legati alla sua modalità d'azione specifica per le zanzare e al fatto che non è stata segnalata alcuna resistenza sul campo nonostante il suo utilizzo per > 30 anni [15]. Lo svantaggio principale è la tempistica e la necessità di una distribuzione ripetuta durante la stagione, mentre un'altra limitazione è che i prodotti disponibili fino ad oggi vengono utilizzati solo per colpire lo stadio larvale del ciclo di vita delle zanzare. Le fonti naturali attualmente in fase di studio per lo sviluppo di nuove attività zanzaracide includono funghi [16, 17], piante [18,19,20,21,22,23,24,25] e microbi [26,27,28,29 ,30,31], di cui le piante sono le più rappresentate.

 25 NP compounds displayed larvicidal activity against the yellow fever mosquito Aedes aegypti, we then further evaluated a selection of the candidate NPs. Several of these proved active also against adult Aedes mosquitoes as well as against the major malaria mosquito vector Anopheles gambiae via several different delivery/exposure routes. In the concluding phase of our study, we went back to the bacterial source of origin of the most promising NP hit compounds bactobolin and ossamycin and verified that a crude extract of the secondary metabolites produced by these bacteria retained mosquitocidal activity. These two NPs stood out from the other hits as they were potent against both larvae and adult life stages. Our results suggest that this underexplored approach is an efficient method for searching for new mosquito-control products and encourages a deeper exploration of the ribosome inhibitor bactobolin from Burkholderia thailandensis and the ATPase inhibitor ossamycin from Streptomyces hygroscopicus var. ossamyceticus as potential biopesticide products./p> 90% by ELSD, major peak has the correct mass ion). The NPs were provided and stored dissolved in DMSO at – 20 °C until use. The screen for larvicidal activity was performed on Ae. aegypti Rockefeller strain L2 larvae. Four larvae were placed in 1 ml hatching broth (1 l deionized water mixed with one tablet of finely ground tropical fish flakes, autoclaved) in a 48-well plate (Corning Falcon polystyrene microplates). Five microliters of the dissolved compound to be tested was added to each well, resulting in a final concentration of 50 µM compound and 0.5% DMSO. All NPs were tested once. There were six negative control wells (0.5% DMSO, no NP) per plate, and all samples were analyzed in relation to the controls on the same plate. The survival of the larvae was noted daily for 7 days./p> 60% mortality at 48 h after injection of 1.4 nmol NP (Fig. 2). NP hits 1, 2, 21 and 24 killed 97%, 68%, 79% and 100%, respectively, of the adult Aedes mosquitoes at this dose. The most potent NP hits, 1 and 24, already caused 97% and 92% mortality, respectively, at 24 h after injection./p> 25% when tested at 0.14 nmol; NP hit 2 killed 3%, 21 killed 10%, and 24 killed 23% (Additional file 1, Table S2). These results indicate that some NP hits identified in the screen displayed the desirable property of both larvicidal and adulticidal activity./p>